Комплект для обнаружения однокислых вирусов монокеупокса (флуоресцентная ПЦР) IVD для монокепок

[Назначение]

Набор для обнаружения нуклеиновой кислоты (флуоресценция ПЦР) используется для обнаружения нуклеиновой кислоты из вируса монокепокса в сыворотке и у человека в образцах пустолярной или везикулярной сыпи у лиц, подозреваемых в инфекционной инфекции вируса монокепокса. Путем специфически обнаруживать фрагменты нуклеиновой кислоты вируса monkeypox, вирус monkeypox может быть быстро определен, который пригоден для быстрой диагностики связанных заболеваний причиненных инфекцией вируса monkeypox.

[Спецификация упаковки]

25 тест/блок, 50 тестов/блок

Примечание.

1. Комплекты с различными номерами партии не взаимозаменяемы.

2. Все биологические образцы в комплекте были погашены.

 

[Требование к образцу]

1. Тип образца

Образцы сыворотки и человеческой пустолярной или везикулярной сыпи.

2. Взятие образцов

Сыворотка: С помощью стерильного шприца соберите 2 мл венозной крови испытуемых, введите ее в стерильную пробирку для взятия образцов, оставьте при комнатной температуре не более 4 часов, дождитесь отделения сыворотки от образца, Или центрифугируйте образец с частотой вращения 4000 об/мин в течение 5 минут при комнатной температуре, чтобы отделить сыворотку и перенести ее в стерильную запасную пробирку для центрифугирования емкостью 1,5 мл. Образцы везикул и пустул: Выберите на коже свежие пузырьки или пустулы, продезинфицируйте их йодофом, а затем протрите йодофор 70% спиртом. После полного испарения спирта, проколите и выдавите из ткани стерильную иглу, окуните ватный тампон в жидкость, быстро поместите ватный тампон в пробирку для взятия образцов емкостью 3-5 мл с консервационной жидкостью, разбейте ватный тампон рядом с верхней частью, затяните крышку трубки и герметично закройте ее для осмотра.

3 хранение и транспортировка образцов

Собранные образцы необходимо немедленно отправить на анализ. Образцы следует проверять в течение 24 часов при хранении при температуре от 2 до 8 °C. Образцы, которые нельзя проверить в течение 24 часов, следует хранить при температуре -70 C или ниже (при отсутствии условий хранения -70 °C образцы можно хранить при температуре от -25 °C до -15 °C в течение 10 дней). Следует избегать нескольких циклов замораживания/размораживания. Образцы следует транспортировать в герметичной замороженной кувшина со льдом или в герметичной пенопластовой коробке со льдом.

 

[Метод проверки]

Перед использованием ознакомьтесь с инструкциями, приведенными в тестовом комплекте.

1. Подготовка реагента (в области подготовки реагента)

1.1 извлеките компоненты из коробки и поместите их при комнатной температуре. После того как температура будет доведена до комнатной, хорошо перемешайте и центрифугируйте образец на короткое время для последующего использования. В соответствии с количеством образцов, которые необходимо проверить, отрицательные контроли и положительные контроли, принимают соответствующее количество компонентов пропорционально (38μL/человек раствора реакции MPV-PCR + 2μL/человек смеси MPV-фермента) и тщательно перемешивают их, чтобы сформировать смесь PCR. Liquid-1, который использовался после мгновенного центрифугирования.

1.2 перенесите вышеуказанные подготовленные реагенты в область обработки образцов для использования.

2. Обработка образца (в области обработки образца)

2.1 Выборка образцов:

Для извлечения образцов следует использовать комплект для извлечения нуклеиновых кислот.

Отрицательный контроль, положительный контроль и образцы, которые необходимо проверить, обрабатываются одновременно.

2.2 Добавить образец

Добавьте 10μL извлеченной ДНК в пробирки для ПЦР в следующем порядке: Отрицательный контроль MPV, положительный контроль MPV и пробу, которую необходимо проверить. Добавьте 40μL основного раствора MPV в каждую лунку. Каждая скважина была запишена. Центрифугируется с частотой вращения 2000 об/мин в течение 10 секунд и помещается на флуоресцентную установку для ПЦР.

3.Усиление ПЦР (в области амплификации и анализа)

Настройки см. в инструкции по эксплуатации каждого прибора.

3.1 поместите пробирки для ПЦР, которые закончили добавление образцов в прибор для ПЦР с флуоресценцией, установите пробные отверстия в соответствии с соответствующей последовательностью добавления образцов, установите пробные отверстия для продуктов контроля качества с положительным результатом, продуктов контроля качества с отрицательным качеством и неизвестных образцов и задайте название образца.

3.2 Система общей реакции: 25μL

3.3 Выбор канала обнаружения флуоресценции:1) Выберите канал FAM (Reporter: FAM, Quencher: None) для обнаружения генов-мишеней вируса monkeypox: 2) Выберите КАНАЛ HEX или VIC (Reporter: HEX/VIC, Quencher: None); 3) установите эталонную флуоресценцию (пассивное эталонное значение) на none ; установите Sample Volume (объем образца) на 50.

3.4 Настройка циклического открытия:

Примечание: Используйте прибор ABI 7500 rea-time fluorescence Quantitative PCR и выберите "None" (Нет) в пассивном эталонном и гаситель.

4.Анализ результатов

После реакции результаты будут автоматически сохранены, а Baseline (Базовая линия) и Threshold (Порог) каждого канала обнаружения будут скорректированы в соответствии с анализированными изображениями. Нажмите "Анализ" для анализа, чтобы все параметры соответствовали требованиям контроля качества, а затем проверьте результаты обнаружения каждого неизвестного образца.

5. Контроль качества

Продукты отрицательного контроля: Кривая FAM не имеет значения CT или CT>40; а определение внутреннего стандарта вируса monkeypox (HEX/VIC) не имеет значения CT или CT>40.

Положительные продукты контроля: Кривая FAM CS35; и обнаружение внутреннего стандарта вируса monkeypox (HEX/VIC) является положительным, CT≤35.

lf при одной проверке оба указанных выше элемента выполняются одновременно, в противном случае вторая проверка считается недействительной, и требуется повторная проверка.
 

[Положительное эталонное значение]

В ходе исследования контрольных значений было установлено, что эталонное значение КТ целевого гена, обнаруженного этим комплектом, равно 40, а эталонное значение КТ внутреннего стандарта равно 40.

[Интерпретация результатов тестирования]

1.значение КТ обнаружения FAM ≤ 40, а внутренний стандарт обнаружения является положительным (значение КТ ≤ 40), сообщенное как положительный вирус monkeypox;

2. Отсутствие значения КТ или значения КТ > 40 при обнаружении FAM, а внутренний стандартный канал обнаружения является положительным (значение КТ ≤ 40), и отчет является отрицательным для вируса monkeypox;

3.lf во внутреннем стандартном тесте нет значения КТ или значения КТ > 40, результат теста образца является недопустимым. Необходимо найти и устранить причину, а образец необходимо повторно взять и повторно протестировать (если результат повторного тестирования по-прежнему недействителен, обратитесь в компанию).

4. Для положительных образцов внутренний стандартный результат не требуется; для отрицательных образцов внутренний стандартный тест должен быть положительным. lf внутренний стандартный тест отрицательный, результат теста недействителен. Образцы повторно отбираются и проводятся повторные эксперименты (если результаты повторных экспериментов все еще недействительны, свяжитесь с нашей компанией).

 

[Положительное эталонное значение]

В ходе исследования контрольных значений было установлено, что эталонное значение КТ целевого гена, обнаруженного этим комплектом, равно 40, а эталонное значение КТ внутреннего стандарта равно 40.

[Интерпретация результатов тестирования]

1.значение КТ обнаружения FAM ≤ 40, а внутренний стандарт обнаружения является положительным (значение КТ ≤ 40), сообщенное как положительный вирус monkeypox;

2. Отсутствие значения КТ или значения КТ > 40 при обнаружении FAM, а внутренний стандартный канал обнаружения является положительным (значение КТ ≤ 40), и отчет является отрицательным для вируса monkeypox;

3.lf во внутреннем стандартном тесте нет значения КТ или значения КТ > 40, результат теста образца является недопустимым. Необходимо найти и устранить причину, а образец необходимо повторно взять и повторно протестировать (если результат повторного тестирования по-прежнему недействителен, обратитесь в компанию).

4. Для положительных образцов внутренний стандартный результат не требуется; для отрицательных образцов внутренний стандартный тест должен быть положительным. lf внутренний стандартный тест отрицательный, результат теста недействителен. Образцы повторно отбираются и проводятся повторные эксперименты (если результаты повторных экспериментов все еще недействительны, свяжитесь с нашей компанией).